一．實驗?zāi)康?nbsp;
1． 了解水中氨氮的測定意義。 2． 掌握水中氨氮的測定方法和原理。
二．實驗原理
氮是蛋白質(zhì)、核酸、酶、維生素等有機物中的重要組分。純凈天然水體中的含氮物質(zhì)是很少的，水體中含氮物質(zhì)的主要來源是生活污水和某些工業(yè)廢水。當(dāng)含氮有機物進(jìn)入水體后，由于微生物和氧的作用，可以逐步分解或氧化為無機氨（NH3）、銨（NH4+）、亞硝酸鹽（NO2-）和**終產(chǎn)物（NO3-）。
氨和銨中的氮稱為氨氮（Ammonia nitrogen 簡稱NH3-N）。水中氨氮的含量在一定程度上反映了含氮有機物的污染情況。在污水綜合排放標(biāo)準(zhǔn)（GB8978-1996）和地表水環(huán)境質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（GB3838-2002）中，氨氮都是重要的監(jiān)測指標(biāo)。
以游離態(tài)的氨或銨離子等形式存在的氨氮與納氏試劑反應(yīng)生成淡紅棕色絡(luò)合物，該絡(luò)合物的吸光度與氨氮含量成正比，于波長420 nm處測量吸光度。
氨氮與納氏試劑反應(yīng)生成棕色膠態(tài)化合物，
干擾及消除：水樣中含有懸浮物、余氯、鈣鎂等金屬離子、硫化物和有機物時會產(chǎn)生干擾，含有此類物質(zhì)時要作適當(dāng)處理，以消除對測定的影響。
若樣品中存在余氯，可加入適量的硫代硫酸鈉溶液去除，用淀粉-碘化鉀試紙檢驗余氯是否除盡。在顯色時加入適量的酒石酸鉀鈉溶液，可消除鈣鎂等金屬離子的干擾。若水樣渾濁或有顏色時可用預(yù)蒸餾法或絮凝沉淀法處理。
三. 儀器與試劑
1． 尤尼柯WFJ7200型可見分光光度計，具20mm比色皿。 2． 納氏試劑（碘化汞-碘化鉀-氫氧化鈉（HgI2-KI-NaOH）溶液）：
稱取 16.0g氫氧化鈉（NaOH），溶于50ml水中，冷卻**室溫。 稱取7.0g碘化鉀（KI）和10.0g碘化汞（HgI2），溶于水中，然后將此溶液在攪拌下，緩慢加入到上述50ml氫氧化鈉溶液中，用水稀釋**100ml。貯于聚乙烯瓶內(nèi)，用橡皮塞或聚乙烯蓋子蓋緊，于暗處存放，有效期1年。
3． 酒石酸鉀鈉溶液：稱取50.0g酒石酸鉀鈉（KNaC4H4O6·4H2O）溶于100mL水中，加
熱煮沸以驅(qū)除氨，充分冷卻后稀釋**100ml。4． 氨氮標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液（1000μg/ml）：稱取3.8190g氯化銨（NH4Cl，優(yōu)級純，在100~105℃
干燥2h），溶于無氨水中，移入1000ml容量瓶中，稀釋**刻度，搖勻。可在2~5℃保存1個月。
5． 氨氮標(biāo)準(zhǔn)工作溶液（10μg/mL）：吸10.00ml氨氮標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液于1000ml容量瓶內(nèi)，用
無氨水稀釋**刻度，搖勻。臨用前配制。
以下為水樣需預(yù)處理時所需試劑
6. 硫代硫酸鈉溶液（3.5g/L）：稱取3.5g硫代硫酸鈉（Na2S2O3）溶于水中，稀釋**1000ml。 7. 硫酸鋅溶液（100g/L）：稱取10.0g硫酸鋅（ZnSO4·7H2O）溶于水中，稀釋**100ml。 8. 氫氧化鈉溶液（250g/L）：稱取25g氫氧化鈉溶于水中，稀釋**100ml。 9. 氫氧化鈉溶液（1mol/L）：稱取4g氫氧化鈉溶于水中，稀釋**100ml。 10. 鹽酸溶液(1mol/L)：量取8.5ml鹽酸于適量水中用水稀釋**100ml。 11. 硼酸（H3BO3）溶液（20g/L）：稱取20g硼酸溶于水，稀釋** 1 L。
12. 溴百里酚藍(lán)指示劑（0.5g/L）：稱取0.05g溴百里酚藍(lán)溶于50ml水中，加入10ml無水乙醇，用水稀釋**100ml。
13. 淀粉-碘化鉀試紙：稱取1.5g可溶性淀粉于燒杯中，用少量水調(diào)成糊狀，加入200ml沸水，攪拌混勻放冷。加 0.50 g碘化鉀（KI）和 0.50 g 碳酸鈉（Na2CO3），用水稀釋**250ml。將濾紙條浸漬后，取出晾干，于棕色瓶中密封保存。
四. 實驗步驟 1. 制備無氨水
每升水加入0.1ml濃硫酸進(jìn)行蒸餾，餾出水接收于玻璃容器中。
2. 校準(zhǔn)曲線的繪制
在7個50ml比色管中，分別加入0.00、0.50、1.00、3.00、5.00、7.00和10.00ml氨氮標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，其所對應(yīng)的氨氮含量分別為0.0、5.0、10.0、30.0、50.0、70.0和100µg，加水**標(biāo)線。加入1.0ml酒石酸鉀鈉溶液，搖勻，再加入納氏試劑1.0ml，搖勻。放置10min后，在波長420nm下，用20mm比色皿，以水作參比，測量吸光度。
以空白校正后的吸光度為縱坐標(biāo)，以其對應(yīng)的氨氮含量（µg）為橫坐標(biāo)，繪制校準(zhǔn)曲線。
3. 樣品預(yù)處理
樣品采集與保存：水樣采集在聚乙烯瓶或玻璃瓶內(nèi)，要盡快分析。如需保存，應(yīng)加硫酸使水樣酸化** pH＜2，2～5℃下可保存 7 d。
去除余氯：若樣品中存在余氯，可加入適量的硫代硫酸鈉溶液去除。每加0.5ml 可去除0.25 mg余氯。用淀粉-碘化鉀試紙檢驗余氯是否除盡。
絮凝沉淀：100ml樣品中加入1ml硫酸鋅溶液和0.1～0.2 ml氫氧化鈉溶液（250g/L，6.25mol/L），調(diào)節(jié)pH約為10.5，混勻，放置使之沉淀，傾取上清液分析。必要時，用經(jīng)水沖洗過的中速濾紙過濾，棄去初濾液20 ml。也可對絮凝后樣品離心處理。
預(yù)蒸餾：將50ml硼酸溶液移入接收瓶內(nèi)，確保冷凝管出口在硼酸溶液液面之下。分取 250 ml樣品，移入燒瓶中，加幾滴溴百里酚藍(lán)指示劑，必要時，用氫氧化鈉溶液(1.0mol/L)或鹽酸溶液調(diào)整pH**6.0（指示劑呈黃色）～7.4（指示劑呈藍(lán)色），加入0.25g輕質(zhì)氧化鎂及數(shù)粒玻璃珠，立即連接氮球和冷凝管。加熱蒸餾，使餾出液速率約為10 ml/min，待餾出液達(dá)200 ml 時，停止蒸餾，加水定容**250 ml。
4. 樣品測定
取經(jīng)預(yù)處理后的適量水樣（使氨氮含量不超過0.1mg），加入50mL比色管中，稀釋**刻度。按與校準(zhǔn)曲線相同的步驟測量吸光度。
注：經(jīng)蒸餾或在酸性條件下煮沸方法預(yù)處理的水樣，須加一定量氫氧化鈉溶液，調(diào)節(jié)水樣**中性，用水稀釋**50 ml標(biāo)線，再按與校準(zhǔn)曲線相同的步驟測量吸光度。
空白試驗：用水代替水樣，按與樣品相同的步驟進(jìn)行前處理和測定。 五. 數(shù)據(jù)處理
由水樣測得的吸光度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得氨氮含量（µg）。
